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El PMSF es un inhibidor irreversible de las serina proteasas como la tripsina, la quimotripsina y las cisteína proteasas. La inhibición de las cisteína proteasas puede revertirse mediante la reducción de los tioles. Se utiliza con frecuencia para la preparación de proteínas a partir de lisados celulares. El PMSF es poco soluble en agua. Las soluciones madre se preparan en disolventes orgánicos (por ejemplo, 10 mg/ml en isopropanol al 10%). La concentración efectiva de PMSF es de 0,1 - 1 mM. La DL₅₀ (ratón, ip.) es de 200 mg/kg. Estabilidad: En soluciones acuosas el PMSF se inactiva muy rápidamente, especialmente al aumentar el pH y la temperatura. Por lo tanto, debe añadirse fresco durante cada etapa de trabajo. A pH 7,0, 7,5 y 8,0 a 25°C la vida media es de 110, 55 y 35 minutos respectivamente. Las soluciones madre (isopropanol) son estables durante unos 9 meses a +4°C (4). Las soluciones madre de PMSF (10 - 100 mM; 1,74 mg/ml - 17,4 mg/ml, respectivamente) se preparan con etanol, metanol o isopropanol anhidro y se almacenan a -20°C. El PMSF puede cristalizar en isopropanol a -20°C. Precaución: El PMSF es extremadamente tóxico para las membranas mucosas del pulmón, los ojos y la piel. Debe evitarse cualquier contacto por inhalación, ingestión o contacto con la piel. En caso de contacto con la piel, lavar inmediatamente con abundante agua. Recomendamos utilizar AEBSF en lugar de PMSF, que es igual de eficaz pero sustancialmente menos tóxico
Literature
(1) Fahrney, D.E. & Gold, A.M. (1963) J. Am. Chem. Soc. 85, 996-1000. Los fluoruros de sulfonilo como inhibidores de las esterasas. I. Velocidades de reacción con acetilcolinesterasa, α-quimotripsina y tripsina. (2) Gold, A.M. & Fahrney, D.E. (1964) Biochemistry 3, 783-791. Los fluoruros de sulfonilo como inhibidores de las esterasas. II. Formación y reacciones de fenilmetanosulfonil α-quimotripsina. (3) Prouty, W.F. & Goldberg, A.L. (1972) J. Biol. Chem. 247, 3341-3352. Efectos de los inhibidores de la proteasa en la descomposición de las proteínas en E. coli. (4) James, G.T. (1978) Anal. Biochem. 86, 574-579. Inactivación del inhibidor de la proteasa fenilmetilsulfonil fluoruro en tampones.
