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El ABTS es insoluble a concentraciones superiores a 56 mM. El calentamiento facilita la disolución del ABTS, por ejemplo, en tampón fosfato 0,1 M. Si cristaliza al enfriar (por ejemplo, en concentraciones de 1 mg/ml), puede utilizarse el sobrenadante. Este comportamiento puede utilizarse para separar el exceso de ABTS (2). A concentraciones inferiores a 0,002 mM, puede ocurrir que, dependiendo de la concentración de peroxidasa, el sustrato ABTS se agote por completo y las mediciones de la actividad enzimática se realicen en el rango no lineal. Los máximos de absorción del ABTS se encuentran a 340 nm y 414 nm, respectivamente. Normalmente, las mediciones se realizan a 420 nm. Las soluciones de ABTS en tampón fosfato-citrato 0,5 M (pH 4,0) son estables durante al menos un mes, si se almacenan a +4°C (5).
Literature
(1) Childs, R.E. & Bardsley, W.G. (1975) Biochem. J. 145, 93-103. La cinética en estado estacionario de la peroxidasa con ABTS como cromógeno. (2) Bruss, M.L. & Black, A.L. (1978) Anal. Biochem. 84, 309-312. Microdeterminación enzimática del glucógeno. (3) Gallati, H. (1979) J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 17, 1-7. Peroxidasa de rábano: determinación de la actividad con H₂O₂ y ABTS. (4) Mäkinen, K.K. & Tenovuo, J. (1982) Anal. Biochem. 126, 100-108. Observaciones sobre el uso de guayacol y ABTS como sustratos de peroxidasa. (5) Szutowicz, A. et al. (1984) Anal. Biochem. 138, 86-94. Determinación colorimétrica de la monoaminoxidasa con ABTS y peroxidasa.
