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TEMED wurde zur Verstärkung der Polymerisation (Vernetzung) von Acrylamid / Bisacrylamid für die Gelelektrophorese eingeführt. Es katalysiert die Bildung von freien Radikalen des Polymerisationsinitiators Ammoniumpersulfat (APS). Da Sauerstoff die Polymerisation hemmt, empfiehlt es sich die Polyacrylamid-Gellösung (nicht jedoch Lösungen für Gradientengele) vor der TEMED-Zugabe zu entgasen. Es wird in einer Konzentration von 50 μl /100 ml Gellösung eingesetzt. Die Stabilität von TEMED ist sehr hoch (2 Jahre), wenn verhindert wird, dass sich Wasser im TEMED anreichern kann.Achtung: TEMED ist gesundheitsschädlich. Dämpfe sollten nicht eingeatmet werden!
Literature
(1) Needles, H.L. (1970) Anal. Biochem. 35, 533-537. Einfluß verschiedener Faktoren bei der Herstellung großporiger Polyacrylamidgele. (2) Ogden, R.C. & Adams, D.A. (1987) Methods Enzymol. 152, 61-87. Überblick über Gelelektrophorese von DNA und RNA mit Rezepten für Puffer und Lösungen und Durchführung der Gelelektrophorese. (3) Gomes, A.V. & Barnes, J.A. (1998) Anal. Biochem. 260, 106-108. Gelelektrophorese von Minigelen.