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ABTS ist bei Konzentrationen über 56 mM unlöslich. Wenn sich ABTS schlecht löst, kann es durch Erhitzen z. B. in 0,1 M Phosphat-Puffer in Lösung gebracht werden. Kristallisiert nach dem Erkalten ABTS wieder aus (z. B. bei Konzentrationen von 1 mg/ml ABTS), kann der Überstand verwendet werden. Überschüssiges ABTS kann durch Kühlen (\+4°C) gezielt auskristallisiert werden (2). Bei Konzentrationen unter 0,002 mM besteht in Abhängigkeit der Peroxidase-Konzentration die Gefahr, dass das Substrat ABTS verbraucht wird und die Messung nicht mehr im linearen Bereich erfolgt. Absorptionsmaxima von ABTS liegen bei 340 nm und 414 nm. Die Messung erfolgt üblicherweise bei 420 nm.Eine ABTS-Lösung in 0,5 M Phosphat-Citrat-Puffer (pH 4,0) ist gekühlt mindestens 1 Monat stabil (5).
FAQs
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Literature
(1) Childs, R.E. & Bardsley, W.G. (1975) Biochem. J. 145, 93-103Untersuchung der Aktivität der Meerrettichperoxidase mit dem Substrat ABTS. (2) Bruss, M.L. & Black, A.L. (1978) Anal. Biochem. 84, 309-312. Enzymatische Mikrobestimmung von Glykogen. (3) Gallati, H. (1979) J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 17, 1-7. Meerrettichperoxidase: Aktivitätsbestimmung mit H₂O₂ und ABTS. (4) Mäkinen, K.K. & Tenovuo, J. (1982) Anal. Biochem. 126, 100-108. Verbesserung des Protokolls mit ABTS zur Aktivitätsbestimmung von Lactoperoxidase. (5) Szutowicz, A. et al. (1984) Anal. Biochem. 138, 86-94. Kolorimetrischer Nachweis von Monoaminoxidase mit ABTS und Peroxidase.
