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X-Gal es un sustrato de la β-galactosidasa. Se utiliza para la identificación de bacterias lacZ+, especialmente para el ensayo de la β-galactosidasa, expresada a partir de vectores recombinantes. La β-galactosidasa escinde el sustrato y libera 5-bromo-4-cloro-3-indoxilo (X). El indoxilo se oxida y se convierte en índigo insoluble. Preparar una solución madre disolviendo 20 mg/ml de X-Gal en dimetilformamida. Almacenar esta solución a -20°C protegida de la luz. Para el uso en placas LB/Ampicilina la solución madre se diluye 1 : 1000 (concentración final 20 μg/ml) o 1 : 500 (concentración final 40 μg/ml). La cantidad de X-Gal puede reducirse si se pulveriza la solución de X-Gal en DMF sobre las placas de agar (con colonias bacterianas crecidas).
Literature
(1) Lojda, Z. et al. (1973) Histochemie 34, 361-369. Sustratos sintéticos en la demostración histoquímica de los disacáridos intestinales. (2) Lin, W.-c. et al. (1990) Cancer Res. 50, 2808-2817. El gen lacZ bacteriano como marcador altamente sensible para detectar la formación de micrometástasis durante la progresión del tumor. (3) Maas, S. (1999) BioTechniques 27, 1126-1128. Procedimiento eficaz y rápido para la selección azul-blanco de clones bacterianos recombinantes.
