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El aislamiento simultáneo de ARN, ADN y proteínas de muestras biológicas fue introducido por Chomczynski (1) y mejorado por otros. El método de Chomczynski se basa en el aislamiento de ácidos nucleicos no degradados (ARN y ADN) con sales de guanidinio y fenol (por ejemplo, ref. 2-5). TRItidy G™ es un reactivo, basado en el método de Chomczynski (1), con modificaciones adicionales para mejorar la pureza del ARN, ADN y proteínas. En primer lugar, el ARN será retenido selectivamente en la fase acuosa durante la extracción ácida con GuaSCN/fenol, mientras que el ADN y las proteínas permanecen en la fase orgánica y en la interfase, respectivamente (6). El ADN se aísla de la fase interfásica/orgánica mediante una simple precipitación con etanol y las proteínas pueden aislarse de la fase orgánica restante.
Literature
(1) Chomczynski, P. (1993) BioTechniques 15, 532-537. Aislamiento simultáneo, en un solo paso, de ARN, ADN y proteínas de muestras de células y tejidos. (2) Cox, R.A. (1968) Methods Enzymol. 12 Parte B, [103a] 120-129. El uso del cloruro de guanidinio en el aislamiento de ácidos nucleicos. (3) Kirby, K.S. (1968) Methods Enzymol. 12 Parte B, [98] 87-99. Aislamiento de ácidos nucleicos con disolventes fenólicos. (4) MacDonald, R.J. et al. (1987) Methods Enzymol. 152, 219-227. Aislamiento de ARN con sales de guanidinio. (5) Feramisco, J.R. et al. (1982) J. Biol. Chem. 257, 11024-11031. Modificación del método GTC para el aislamiento de ARN según Chirgwin. (6) Wallace, D.M. (1987) Methods Enzymol. 152, 33-41. Extracción de fenol a gran y pequeña escala. (7) Chomczynski, P. & Mackey, K. (1995) Anal. Biochem. 225, 163-164. Sustitución del cloroformo por el bromocloropropano en el método de aislamiento de ARN en un solo paso (8) Chomczynski, P. & Mackey, K. (1995) BioTechniques 19, 942-945. Modificación del procedimiento del reactivo TRI para el aislamiento de ARN de fuentes ricas en polisacáridos y proteoglicanos. (9) Monstein, H.-J. et al. (1995) BioTechniques 19, 340-344. Extracción de ARN del tracto gastrointestinal y del páncreas mediante un método modificado de Chomczynski y Sacchi.
