Comments
Para la separación de oligonucleótidos con un número reducido de bases, se utilizan geles de acrilamida con un tamaño de poro pequeño. El tamaño del poro está determinado por la concentración total de acrilamida y la proporción de acrilamida : bisacrilamida. Para la secuenciación de ácidos nucleicos se utiliza una proporción de acrilamida : bisacrilamida de 19 : 1. Precaución: La acrilamida es una potente neurotoxina que se absorbe a través de la piel. Los efectos de la acrilamida son acumulativos. Aunque se sospecha que la poliacrilamida no es tóxica, debe manipularse con mucho cuidado debido a la posibilidad de que contenga pequeñas cantidades de acrilamida no polimerizada.
Literature
(1) Peacock, A.C. & Dingman, C.W. (1967) Biochemistry 7, 668-674. Estimación del peso molecular y separación del ácido ribonucleico por electroforesis en geles compuestos de agarosa-acrilamida. (2) Ambrose, B.J.B. & Pless, R.C. (1987) Methods Enzymol. 152, 522-538. Secuenciación del ADN: Métodos químicos. (3) Sambrook, J., Fritsch, E.F. & Maniatis, T. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, Nueva York. (4) Ausubel, F.A., Brent, R., Kingston, R.E., Moore, D.D., Seidman, J.G., Smith, J.A. & Struhl, K. (eds.) (1995) Current Protocols in Molecular Biology. Greene Publishing & Wiley-Interscience, Nueva York.
