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EGTA ist ein für Calcium spezifischer Chelator und kann in Gegenwart von Mg2+ angewendet werden, da es eine 1000fach niedrigere Affinität für Mg2+ besitzt. EGTA hemmt Metalloproteasen in einer Konzentration zwischen 1 und 10 mM und wird häufig den Inhibitor-Cocktails zugesetzt (3). Auch die DNase in Pflanzenzellkernen wird in Kombination mit 160 mM L-Lysin in einer Konzentration von 4 mM EGTA ausreichend gehemmt, um DNA-Fragmente im Megabasen-Größenbereich zu isolieren (4). Lösungen von EGTA werden mit 1 g in 10 ml 1 M NaOH angesetzt und auf 100 ml mit Wasser aufgefüllt (ergibt eine 26,29 mM EGTA-Lösung).
Literature
(1) Berman, M.C. (1982) J. Biol. Chem. 257, 1953-1957. Stimulierung des Ca2+-Transports von Vesikeln des sarcoplasmatischen Retikulums mit dem Ca2+-EGTA-Komplex. (2) Fuller, R.S. et al. (1989) Proc. Natl. Acad. Sci USA 86, 1434-1438. Ca2+-Abhängigkeit des Prohormon-prozessierenden Enzyms (KEX2) aus Hefe. (3) Gegenheimer, P. (1990) Methods Enzymol. 182, 174-193. Herstellung von Extrakten aus Pflanzen. (4) Liu, D. & Wu, R. (1999) BioTechniques 26, 258-261. Hemmung der DNase-Aktivität in Pflanzenzellkernen mit L-Lysin und EGTA.
