Comments
ATP wird in der Regel als 100 mM wässrige Stammlösung angesetzt und bei -20°C gelagert. Diese Lösungen haben einen sauren pH-Wert. Wenn ATP in höheren Konzentrationen eingesetzt wird, muss der pH-Wert erhöht werden. Beim Luciferase-Nachweis aus Extrakten transfizierter Zellen wird ATP z.B. in einer Endkonzentration von 5 mM eingesetzt. Würde der pH-Wert nicht erhöht, wäre eine Bestimmung der Luciferase-Aktivität nicht möglich. Deshalb wird die Stammlösung in diesem Fall so hergestellt, indem das ATP in Wasser (9/10 des Endvolumens) gelöst wird und 2 M Tris Base (1/10 des Endvolumens) zugegeben wird.
Literature
(1) Kanfer, J.N. & Spielvogel, C.H. (1973) Biochim. Biophys. Acta 327, 405-411. Hemmung der β-N-Acetylhexosaminidase durch Laktone. (2) Janknecht, R. et al. (1995) Oncogene 10, 1209-1216. Untersuchung des Transkriptionsfaktors SAP1a mit Luciferase-Reportergenkonstrukten.